Ko Kary Mullis te toa o te Nobel, te kaihanga o te tauhohenga mekameka polymerase DNA, kua mate

Ko Kary Mullis te toa o te Nobel, te kaihanga o te tauhohenga mekameka polymerase DNA, kua mate I mate a Kary Mullis i California i te 74 o ona tau. E ai ki tana wahine, i mate i te 7 o Akuhata. Ko te mate o te ngakau me te mate manawa na te mate pneumonia.

Ko James Watson tonu, te tangata i kitea te ngota ngota DNA, ka korero mai ki a tatou mo tana koha ki te matū koiora me te mea i whakawhiwhia e ia te Tohu Nobel.

He wahanga mai i te pukapuka na James Watson, Andrew Berry, Kevin Davis

DNA. History of the Genetic Revolution

Upoko 7. Ira tangata. Te ahuatanga o te oranga


...
I hangaia te tauhohenga mekameka polymerase (PCR) i te tau 1983 e te tohunga koiora a Carey Mullis, i mahi i Cetus. He mea whakamiharo te kitenga o tenei tauhohenga. Ua haamana‘o o Mullis i muri a‘e: “I te hoê ahiahi pae pae i te ava‘e eperera 1983, ua fana‘o vau i te hoê epiphany. Tei muri au i te huira, te faahoro ra na raro i te hoê purumu o te mou‘a tei haamaramaramahia e te apeehia i California Apatoerau, te fenua o te mau uru raau uteute.” He mea whakamīharo i roto i taua ahuatanga i pa mai te whakahihiri ki a ia. A ehara i te mea ko te raki o California he rori motuhake e whakatairanga ana i te matauranga; Ko te mea ko tana hoa i kite i a Mullis e tere haere ana i runga i te ara waka rua hukapapa, a, kaore rawa i raru i a ia. I korero tetahi hoa ki te New York Times: "I kite a Mullis ka mate ia ma te pakaru ki te rakau whero. No reira, kare ia e mataku ki tetahi mea i a ia e taraiwa ana, ki te kore he rakau whero e tupu ana i te huarahi. Ko te noho mai o nga rakau whero i te taha o te huarahi i kaha ai a Mullis ki te aro me ... i konei, he maarama. I whiwhi a Mullis i te Nobel Prize in Chemistry mo tana hangahanga i te tau 1993, a, mai i tera wa kua tauhou ki ana mahi. Hei tauira, he tangata tautoko ia i te ariā revisionist e kore e hono te AIDS ki te HIV, i tino whakararu i tona ake ingoa me te whakararu i nga taote.

Ko te PCR he tauhohenga ngawari noa. Hei whakatutuki, ka hiahia kia rua nga matū tuatahi kua whakahiatohia e te matū e hono ana ki nga pito rereke o nga whenu rereke o te kongakonga DNA e hiahiatia ana. He wahanga poto o te DNA whenu kotahi, he 20 pea te roa o ia turanga takirua. Ko te ahuatanga o nga mea tuatahi ko te rite ki nga waahanga DNA e tika ana kia whakanuia, ara, te tauira DNA.

Ko Kary Mullis te toa o te Nobel, te kaihanga o te tauhohenga mekameka polymerase DNA, kua mate
(Ka taea te panui te ahua) Kary Mullis, te kaihanga o PCR

Ko te motuhake o te PCR e ahu mai ana i te hanganga o nga matatini taapiri i waenga i te tauira me nga tuatahi, he oligonucleotides waihanga poto. He taapiri ia o nga papa tuatahi ki tetahi o nga whenu o te tauira wea-rua, ka whakawhāiti i te timatanga me te mutunga o te rohe whakakaha. Inaa, ko te "matrix" ka puta he ira tangata katoa, a ko ta matou whainga ko te wehe i nga kongakonga e pai ana ki a matou. Hei mahi i tenei, ka whakamahanahia te tauira DNA whenu-rua ki te 95 °C mo etahi meneti hei wehe i nga whenu DNA. Ka kiia tenei wahanga he denaturation na te mea kua pakaru nga here hauwai i waenga i nga whenu DNA e rua. Kia wehea nga whenu, ka whakahekehia te mahana kia pai ai te here o nga mea tuatahi ki te tauira whenu kotahi. Ka timata te DNA polymerase ki te tukuruatanga DNA ma te herea ki tetahi toronga o te mekameka nucleotide. Ko te enzyme DNA polymerase e tukurua ana i te whenu tauira ma te whakamahi i te tuatahi hei tauira mo te kape. Ko te hua o te huringa tuatahi, ka whiwhi tatou i te rearua raupapa maha o tetahi waahanga DNA. I muri mai ka whakahoki ano i tenei tikanga. Whai muri i ia huringa ka whiwhi tatou i te waahi whainga i te rahinga rua. I muri i te rua tekau ma rima o nga huringa PCR (ara, i roto i te iti iho i te rua haora), kei a matou te rohe DNA e pai ana ki a matou i roto i te nui o te 225 nga wa teitei ake i te taketake (ara, kua whakanuia e matou i te 34 miriona wa). Inaa, i te whakaurunga ka whiwhi matou i te ranunga o nga tuatahi, tauira DNA, DNA polymerase enzyme me nga turanga kore utu A, C, G me T, te nui o te hua tauhohenga motuhake (whakaitihia e nga primers) ka tipu haere, me te maha o " roa” Ko nga kape DNA he rarangi, no reira ko nga hua tauhohenga te rangatira.

Ko Kary Mullis te toa o te Nobel, te kaihanga o te tauhohenga mekameka polymerase DNA, kua mate
Te whakanui i te waahanga DNA e hiahiatia ana: tauhohenga mekameka polymerase

I nga ra tuatahi o te PCR, ko te raru nui ko enei e whai ake nei: i muri i ia huringa whakamahana-matao, me whakauru te DNA polymerase ki te ranunga tauhohenga, na te mea kua kore e whakakorikoria i te mahana o te 95 ° C. No reira, me taapiri ano i mua i ia o nga huringa 25. Ko te tikanga o te tauhohenga he tino koretake, he nui te wa me te enzyme polymerase, a he tino utu nga taonga. Waimarie, i tae mai a Whaea Nature ki te whakaora. He maha nga kararehe e pai ana ki te mahana i runga ake i te 37 °C. He aha te ahua o te whika 37 °C i mea nui ki a tatou? I puta mai tenei na te mea he pai rawa atu tenei pāmahana mo te E. coli, no reira i whiwhi tuatahi ai te whanariki polymerase mo te PCR. I roto i te taiao he microorganisms kua kaha ake te atete ki nga wera nui o ratou pūmua, i roto i nga miriona tau o te kowhiringa taiao. Kua whakaarohia kia whakamahia nga polymerases DNA mai i nga huakita thermophilic. Ko enei enzyme i puta mai he whakamaahuru me te kaha ki te tu atu i nga huringa tauhohenga maha. Na to raatau whakamahinga i taea ai te ngawari me te whakaaunoa i te PCR. Ko tetahi o nga polymerases DNA whakamaarama tuatahi i wehea mai i te huakita Thermus aquaticus, e noho ana ki nga puna wera o Yellowstone National Park, ka tapaina ko Taq polymerase.

I tere te PCR hei mahi mo te Kaupapa Genome Tangata. I te nuinga o te waa, kaore he rereke o te tukanga mai i te mea i whakawhanakehia e Mullis, kua oti noa te mahi aunoa. Kua kore matou e ti'aturi i runga i te tini o nga tauira paetahi porangi e whakapau kaha ana ki te riringi wai ki roto i nga ipuipu kirihou. I roto i nga taiwhanga hou e kawe ana i nga rangahau ira rapoi, ka mahia tenei mahi ki runga i nga kaikawe karetao. Ko nga karetao PCR e whai waahi ana ki tetahi kaupapa raupapa rite te nui o te Human Genome e mahi tonu ana me te nui o te polymerase pumau-wera. Ko etahi o nga kaiputaiao e mahi ana i te Human Genome Project i tino pukuriri na te nui o nga utu utu nui i tapirihia ki te utu o nga kai pau e te rangatira o te patent PCR, te hoia a Hoffmann-LaRoche.

Ko tetahi atu "maataapono taraiwa" ko te tikanga raupapa DNA ano. Ko te kaupapa matū o tenei tikanga ehara i te mea hou i tera wa: i whakamahia e te Interstate Human Genome Project (HGP) te tikanga mohio i whakawhanakehia e Fred Sanger i waenganui o te 1970s. Ko te mea hou kei roto i te tauine me te tohu o te aunoatanga i taea e te raupapatanga te whakatutuki.

I whakawhanakehia te raupapatanga aunoa i te taiwhanga a Lee Hood i te Whare Hangarau o California. I haere ia ki te kura tuarua i Montana, a, i takaro ia i te whutupaoro korowha hei quarterback; He mihi ki a Hood, neke atu i te kotahi te wa i toa ai te kapa i te whakataetae a te kawanatanga. I whai hua ano ana pukenga mahi tahi i roto i ana mahi putaiao. Ko te taiwhanga o Hood he kaimahi motley o nga kaimoana, tohunga koiora, me nga miihini, a, kaore i roa kua riro tana taiwhanga hei kaiarahi mo nga mahi hangarau.

Ko te tikanga, na Lloyd Smith raua ko Mike Hunkapiller te tikanga whakaraupapa aunoa. Ko Mike Hunkapiller, e mahi ana i te taiwhanga o Hood i tera wa, i toro atu ki a Lloyd Smith me te tono mo tetahi tikanga whakapai ake kia rereke te tae o ia momo turanga. Ka taea e taua whakaaro te whakawha i te kaha o te tukanga Sanger. I Sanger, i te wa e raupapa ana i ia o nga ngongo e wha (kia rite ki te maha o nga turanga), me te whakauru o te DNA polymerase, ka hangaia he huinga ahurei o oligonucleotides o nga roa rereke, tae atu ki te raupapa tuatahi. I muri mai, ka whakauruhia te formamide ki nga ngongo mo te wehenga mekameka me te polyacrylamide gel electrophoresis i mahia i runga i nga huarahi e wha. I roto i te putanga a Smith raua ko Hunkapiller, ka tapaina nga dideoxynucleotides ki nga tae rereke e wha, ka mahia te PCR ki te ngongo kotahi. Na, i te wa o te polyacrylamide gel electrophoresis, he kurupae laser i tetahi waahi motuhake i runga i te reera ka whakahihiri i te mahi o nga waikano, a ka whakatauhia e te kairapu ko tehea nucleotide e heke ana i roto i te reera. I te tuatahi, he pohewa noa iho a Smith - i mataku ia ko te whakamahi i nga pota waikano tino iti ka kore e kitea nga rohe nucleotide. Heoi, he tino mohio ki te hangarau taiaho, kare i roa ka kitea e ia he huarahi ki waho o te ahuatanga ma te whakamahi i nga waikano fluorochrome motuhake e rere ana ina pa ana ki te radiation laser.

Ko Kary Mullis te toa o te Nobel, te kaihanga o te tauhohenga mekameka polymerase DNA, kua mate
(Putanga katoa mā te pāwhiri - 4,08 MB) He pai te tuhi: Ko te raupapa DNA i raupapahia ma te whakamahi i te raupapa raupapa aunoa, i riro mai i te miihini raupapa aunoa. He rite ia tae ki tetahi o nga turanga e wha

I roto i te putanga matarohia o te tikanga Sanger, ko tetahi o nga whenu o te DNA kua tātarihia hei tauira mo te whakahiatotanga o te whenu taapiri e te enzyme DNA polymerase, katahi ka tohua te raupapa o nga kongakonga DNA ki roto i te reera ma te rahi. Ko ia kongakonga, ka whakaurua ki roto i te DNA i te wa e whakahiatohia ana, ka taea te whakaatu i muri mai o nga hua tauhohenga, ka tapaina ki te waikano korikori e rite ana ki te turanga kapeka (i korerohia tenei i te wharangi 124); no reira, ko te rewharewha o tenei kongakonga ka waiho hei tautohu mo tetahi turanga. Ko nga mea e toe ana ko te mahi tirotiro me te whakaata i nga hua tauhohenga. Ka wetewetehia nga hua e te rorohiko, ka whakaatuhia hei raupapa o nga tihi maha-tae e rite ana ki nga nucleotides e wha. Ko nga korero ka whakawhiti tika ki te punaha korero a te rorohiko, ka whakakore i te wa e kai ana, i etahi wa ka mamae te tukanga whakauru raraunga i tino uaua ai te raupapa.

» Ka kitea etahi atu korero mo te pukapuka i paetukutuku a te kaiwhakaputa
» Ripanga o nga ihirangi
» Panui

Mo Khabrozhiteley 25% hekenga ma te whakamahi coupon - PCR

Source: will.com

Tāpiri i te kōrero