á¡áá±ááááẠáá¬áá¯áá±áááá¯áááºáá¯ááŸáẠKary Mullis ááẠá¡ááẠáá ááŸá áºááœáẠáááºáá®ááá¯ážáá®ážáá¬ážá ááœááºááœááºáá²á·áááºá áá±áá¯á¶ážáá°á ááá®ážááŒá áºáá°á ááŒá±á¬ááŒá¬ážáá»ááºá¡á ááŒáá¯áẠá áááºá ááŒá áºááœá¬ážáá²á·ááŒá±á¬ááºáž ááááááºá á¡ááŒá±á¬ááºážáááºážááŸá¬ á¡áá¯ááºá¡á¡á±ážááááŒááºážááŒá±á¬áá·áº ááŸáá¯á¶ážááŸáá·áº á¡áááºááŸá°áááºážááŒá±á¬ááºážááá¯ááºáᬠáá»áá¯á·ááœááºážááŸá¯ááŒá áºáááºá
DNA áá±á¬áºáá®áá»á°ážááᯠááŸá¬ááœá±ááœá±á·ááŸááá° James Watson ááá¯ááºááá¯ááºá áá®ááá¬áá¯áá±áááá¯ááºáᬠáá¶á·ááá¯ážáá°áá®ááŸá¯áá²á· ááá¯áááºááºáá¯ááá²á·áá²á·á¡ááŒá±á¬ááºáž ááŒá±á¬ááŒáá«áááá·áºáááºá
James Watsoná Andrew Berryá Kevin Davis á á á¬á¡á¯ááºá០áá±á¬ááºáá¯ááºáá»ááº
DNAá áá»áá¯ážááá¯ážáá®ááá±á¬áºááŸááºáá±ážáááá¯ááºáž
á¡áááºáž áá áá°á·áá»á®ááá¯ááºá áááá¬ááºááŒá±á¬ááºáž
...
Polymerase ááœááºážáááºáá¯á¶á·ááŒááºááŸá¯ (PCR) ááᯠCetus ááœááºá¡áá¯ááºáá¯ááºáá±á¬áá®ááá¬áá¯áá±áááá¬ááŸáẠCarey Mullis á០1983 áá¯ááŸá
áºááœááºáá®ááœááºáá²á·áááºá áá®áá¯á¶á·ááŒááºááŸá¯ááᯠááŸá¬ááœá±ááœá±á·ááŸáááŸá¯á á¡áá±á¬áºáá±ážááᯠááŸááºáá¬ážá
áá¬áá«á áá±á¬ááºááá¯ááºážááœáẠáá°áá®á á€ááá¯á·ááŒááºááŒá±á¬ááŒáááºâ âáááá áá¯ááŸá
Ạá§ááŒá®ááá²á·áá±á¬ááŒá¬ááá±áááºážáá
áºáá¯ááŸá¬ áá»áœááºáááŸá¬ áá±á¬áá«áá±ááá¬áá
áºáá¯ááŸááá²á·áá«áááºá áá
áºáá¬ážáá
áºáá±á¬ááœá±ááŒá
áºáá²á· áááºáá®ááá¯ážáá®ážáá¬ážááŒá±á¬ááºááá¯ááºážá ááá±á¬ááºáá±á¬ááºáá±áá²á· áá±á¬ááºáá±á«áºáááºážááᯠááŒááºáá±á¬ááºážáááºáž áá®ážáá±á¬ááºááá± ááá¯ááºááœá¬ážáááºáâ áá®ááá¯á¡ááŒá±á¡áá±áá»áá¯ážááŸá¬ áá°á·ááᯠááŸá¯á¶á·áá±á¬áºááŸá¯áá±ážáá²á·áᬠá¡áááºááŒá®ážá
áá¬áá«áá²á ááá¯á·á¡ááŒáẠáááºáá®ááá¯ážáá®ážáá¬ážááŒá±á¬ááºááá¯ááºážááœáẠááá¯ážááœááºážááááŒááºááŸá¯ááᯠááŒáŸáá·áºáááºáá±ážááá·áº á¡áá°ážáááºážáá»á¬ážááŸáááẠááá¯ááºáá«áá¬ážá áá°á·áá°áááºáá»ááºáž Mullis áᬠá¡á±ážáá²áá²á· ááá¬ážááœá²áááºážáá
áºáá»áŸá±á¬áẠááááºáááŒáẠá¡ááŸáááºááŒááºážááŒááºážáá²á· á¡ááŸáááºááŒááºážááŒááºáž áá±á¬ááºážááŸááºáá±áá¬ááᯠááŒááºáá°ážááŒá®áž áá°á·á¡ááœáẠáá¯á¶ážá á¡ááŸá±á¬ááºá¡ááŸáẠáááŒá
áºáá²á·áá«áá°ážá áá°áááºáá»ááºážáá
áºáá±á¬ááºá New York Times ááá¯ááŒá±á¬ááŒáááºâ âáá®áá®áá
áºáááºááá¯áááºááá¯ááºááááá¯á· áá±áá±á¬á·áááºááá¯á· Mullis á ááŒááºáá°ážáááºá áá«ááŒá±á¬áá·áº áááºážááá»áŸá±á¬ááºááŸá¬ áá
áºáá®áááºááœá± ááá±á«ááºáá°ážááá¯ááẠáá¬ážáá±á¬ááºážáááºáž áá¬ááá¯á០áááŒá±á¬ááºáá°ážâ áááºážááá»áŸá±á¬ááºááœáẠáá
áºáá®áááºáá»á¬ážááŸááá±ááŒááºážááẠMullis ááᯠá¡á¬áá¯á¶á
á°ážá
áá¯ááºááẠááœááºážá¡á¬ážáá±ážáá²á·ááŒá®áž ... á€áááºááŸá¬ á¥á¬ááºááá¬áá
áºáá¯ááŒá
áºáááºá Mullis ááẠáááºážááá®ááœááºááŸá¯á¡ááœáẠáá¬áá¯áá±áááá¯áááºááºáá¯ááᯠ1983 áá¯ááŸá
áºááœáẠáááŸááá²á·ááŒá®áž áá±á¬ááºááá¯ááºážááœáẠáá°á áá¯ááºáá±á¬ááºáá»ááºáá»á¬ážááœááºááẠáá°ážáááºážáá¬áá²á·áááºá á¥ááá¬á¡á¬ážááŒáá·áºá AIDS ááẠHIV ááŸáá·áº ááááºááá¯ááºááŒá±á¬ááºáž ááŒááºáááºááŒááºáááºáá±ážáá®á¡áá¯áá®ááᯠáá±á¬ááºáá¶áá°ááŒá
áºááŒá®áž áááºážááá¯ááºáááá¹áá¬ááᯠáááááá¬áᬠááááá¯ááºá
á±ááŒá®áž ááá¬áááºáá»á¬ážááᯠá¡ááŸá±á¬áá·áºá¡ááŸááºáá±ážáááºá
PCR ááẠááá¯ážááŸááºážáá±á¬ áá¯á¶á·ááŒááºááŸá¯ááŒá áºáááºá áááºážááá¯áá¯ááºáá±á¬ááºáááºá ááá¯á¡ááºáá±á¬ DNA á¡ááá¯ááºážá¡á áá»á¬ážá ááá·áºáá»ááºáááºá áœááºážáá»á¬ážááŸáá·áº áá±á«ááºážá ááºáá¬ážáá±á¬ áá¬áá¯áá±ááááºážááŒáá·áºáá±á«ááºážá ááºáá¬ážáá±á¬ primer ááŸá áºáᯠááá¯á¡ááºáá«áááºá Primers áá»á¬ážááẠááŒáá¯ážáá áºáá»á±á¬ááºážáááºážááŸááá±á¬ DNA á á¡ááá¯ááºážááá¯áá»á¬ážááŒá áºááŒá®áž áá áºáá¯á á®ááẠá¡áá»á¬áž 20 ááá·áºááŸá á¡ááŒá±áá¶á¡ááœá²áá»á¬ážááŒá áºáááºá Primers ááá°ážááŒá¬ážáá»ááºááŸá¬ áááºážááá¯á·ááẠáá»á²á·ááœááºááẠááá¯á¡ááºáá±á¬ DNA á¡ááá¯ááºážáá»á¬ážááŸáá·áº áááºááá¯ááºááŒá±á¬ááºážá ááá¯ááá¯áááºááŸá¬ DNA ááá°áá¬áá¯á¶á á¶ááŒá áºáááºá
(áá¯á¶ááá¯ááŸáááºááááá¯ááºáááº) PCR áá®ááœááºáá° Kary Mullis
PCR á áá®ážááŒá¬ážáá°ážááŒá¬ážáá»ááºááŸá¬ áá¯á¶á á¶áááááºááŸáá·áº primers áá»á¬ážá¡ááŒá¬áž áá±á«ááºážá ááºááŸá¯ááºááœá±ážáá±á¬ áá±á«ááºážá ááºááœá²á·á ááºážááŸá¯á ááá¯áá±á¬ááºážáá±á¬ áá¬áᯠoligonucleotides áá»á¬ážáá±á«áºááœáẠá¡ááŒá±áá¶áááºá primer áá áºáá¯á á®ááẠdouble-stranded template á strands áá áºáá¯ááŸáá·áºáá áºáá¯ááŒáá·áºá áœááºááŒá®áž amplified area áá¡á ááŸáá·áºá¡áá¯á¶ážááá¯ááá·áºáááºáá¬ážáááºá á¡ááŸááºáá±á¬á·á áááẠ"áááºááá áº" ááẠáá»á®ááá¯ááºáá áºáá¯áá¯á¶ážááŒá áºááŒá®áž áá»áœááºá¯ááºááá¯á·ááááºážááá¯ááºááŸá¬ áá»áœááºá¯ááºááá¯á·á¡ááœáẠá¡áá»áá¯ážá á®ážááœá¬ážá¡ááá¯ááºážá¡á áá»á¬ážááᯠáááºážááŸáá·áºááœá²áá¯ááºáááºááŒá áºáááºá ááá¯ááá¯á·ááŒá¯áá¯ááºáááºá DNA ááŒáá¯ážáá»á¬ážááᯠááœá²áá¯ááºááẠáááá áºá¡áá±á¬áºááŒá¬ 95°C ááœáẠááŒáá¯ážááŸá áºááẠDNA áá¯á¶á á¶ááᯠá¡áá°áá±ážáááºá DNA ááŒáá¯ážááŸá áºáá¯ááŒá¬ážááŸá ááá¯ááºáááá¯áá»ááºááŸá±á¬ááºááŒáá¯ážáá»á¬áž áá»áá¯ážááœá¬ážáá±á¬ááŒá±á¬áá·áº á€á¡ááá·áºááᯠdenaturation áá¯áá±á«áºáááºá ááŒáá¯ážáá»á¬ážááᯠááœá²ááœá¬ááŒá®ážáááºááŸáá·áºá primers áá»á¬ážááᯠááŒáá¯ážáá áºáá»á±á¬ááºážáááºážááŒáá·áº áá»ááºááŸá±á¬ááºááá¯ááºá á±ááẠá¡áá°áá»áááºááᯠáá»áŸá±á¬á·áá»áááºá DNA polymerase ááẠnucleotide ááœááºážáááºáá áºáá¯ááŸáá·áº áá»áááºáááºááŒááºážááŒáá·áº DNA ááœá¬ážááŒááºážááᯠá áááºáááºá á¡ááºááá¯ááºáž DNA polymerase ááẠáá¯á¶á á¶áááááºááŒáá¯ážáá»áŸááºááᯠprimer ááá¯á·ááá¯áẠáá°ážáá°áááºá¡ááœáẠááá°áá¬á¡ááŒá Ạprimer ááᯠá¡áá¯á¶ážááŒá¯á áá¯á¶á á¶áá°ááœá¬ážáááºá áááá ááºáááºážáááááºá¡áá±ááŒáá·áºá áá»áœááºá¯ááºááá¯á·ááẠá¡áá»áá¯á·áá±á¬ DNA á¡ááá¯ááºážáá áºáá¯á áááºááá¯ááºááŸá áºááá»á¬ážá áœá¬ááᯠáááŸááááºá áá±á¬ááºáá áºáá¯ááá±á¬á· áá®áá¯ááºáá¯á¶ážáá¯ááºáááºážááᯠááŒááºáá¯ááºáááºá áááºáááºááŸá¯áá áºáá¯á á®ááŒá®ážáá±á¬áẠáá»áœááºá¯ááºááá¯á·ááẠááá¬áááŸá áºáááŒáá·áº áá áºááŸááºáá±áá¬ááᯠááá°áááºá ááŸá áºááá·áºáá«áž PCR áááºáááºááŒá®ážáá±á¬áẠ(ááá¯ááá¯áááºááŸá¬ ááŸá áºáá¬áá®áááºáááºážáá±á¬) ááœááºá áá»áœááºá¯ááºááá¯á·ááẠáá°áááºážááẠ225 á ááá¯ááá¯áá»á¬ážááŒá¬ážáá±á¬ ááá¬áááŒáá·áº áá»áœááºá¯ááºááá¯á·á¡ááœáẠá áááºáááºá á¬ážááœáẠDNA áá±áááᯠáááŸáááẠ(ááá¯ááá¯áááºááŸá¬á áá»áœááºá¯ááºááá¯á·ááẠáááºážááᯠá¡ááŒááẠ34 áááºážááá·áº áá»á²á·ááœááºáá¬ážáááº)á á¡ááŸááºááŸá¬á ááá·áºááœááºážááŸá¯ááœáẠáá»áœááºá¯ááºááá¯á·ááẠprimersá template DNAá DNA polymerase enzyme ááŸáá·áº free bases A, C, G ááŸáá·áº T ááá¯á·á áá±á¬ááŸá±á¬ááŸá¯ááᯠáááŸááá²á·ááŒá®ážá áááá»áá±á¬áá¯á¶á·ááŒááºááŸá¯áá¯ááºáá¯ááºáá áºáá¯áááá¬á (primers ááŒáá·áºááá·áºáááºáá¬ážáááº) á¡áá±á¡ááœááºááẠá¡áááá¯ážáá»á¬ážáá¬ááŒá®ážá ááŸááºáá»á¬ážáá±á¬ DNA áááá¹áá°áá»á¬ážááẠáá áºááŒá±ážáá®ááŒá áºááŒá®áž áá¯á¶á·ááŒááºááŸá¯áá¯ááºáá¯ááºáá»á¬ážááœáẠááœáŸááºážááá¯ážáá¬ážáááºá
á¡ááá¯ááŸááá±á¬ DNA á¡ááá¯ááºážááᯠáá»á²á·ááœááºááŒááºáž- polymerase ááœááºážáááºáá¯á¶á·ááŒááºááŸá¯
PCR áá¡á á±á¬ááá¯ááºážáá¬ááá»á¬ážááœááºá á¡áááááŒá¿áá¬ááŸá¬ á¡á±á¬ááºáá«á¡ááá¯ááºážááŒá áºáááº- á¡áá°-á¡á¡á±ážá ááºáááºážáá áºáá¯á á®ááŒá®ážáá±á¬ááºá á¡áá°áá»ááẠ95 áá®ááá®á ááºáá®áááááºááœáẠá¡áááºááááºáá±á¬ááŒá±á¬áá·áº DNA áá±á«áºáá®áá¬áááºááᯠáá¯á¶á·ááŒááºááŸá¯á¡áá±á¬á¡ááŸá±á¬áá²ááá¯á· ááá·áºááá«áááºá ááá¯á·ááŒá±á¬áá·áº 25 cycles áá áºáá¯á á®áááá¯ááºáá® áááºážááᯠááŒááºááá·áºááẠááá¯á¡ááºáá«áááºá áá¯á¶á·ááŒááºááŸá¯áá¯ááºáá¯á¶ážáá¯ááºáááºážááẠá¡áá±á¬áºáááºáááá±á¬ááºááŸá¯áááŸááá«á á¡áá»áááºáá»á¬ážá áœá¬ááŸáá·áº ááá¯áá®áá¬áááºá¡ááºááá¯ááºážááá¯á¡ááºááŒá®áž áá á¹á ááºážááẠá¡ááœááºá á»á±ážááŒá®ážáá«áááºá áá¶áá±á¬ááºážá áœá¬áá²á·áá² Mother Nature á áááºáááºááá¯ááºáá²á·áá«áááºá áááá á¹áá¬ááºáá»á¬ážá áœá¬ááẠá¡áá°áá»ááẠáá áá®ááá®á ááºáá®áááááºááẠááŒáá·áºáá¬ážáá±á¬áá±áá¬ááœáẠáááºáá±á¬áá·áºáááºáá¬ááŸáááŒáááºá áá áá®ááá®á ááºáá®áááááºááẠáá»áœááºá¯ááºááá¯á·á¡ááœáẠá¡áááºááŒá±á¬áá·áº á¡áá±ážááŒá®ážááááºážá PCR á¡ááœáẠáá°ááááŸááá±á¬ áá±á«áºáá®áá¬áááºá¡ááºááá¯ááºážá០á€á¡áá°áá»áááºááẠE. coli á¡ááœáẠá¡áá±á¬ááºážáá¯á¶ážááŒá áºáá±á¬ááŒá±á¬áá·áº ááŒá áºáááŒááºážááŒá áºáá«áááºá ááá¬áááœáẠáááá¯áááºážáá»á¬ážááẠááŸá áºáááºážáá±á«ááºážáá»á¬ážá áœá¬ááŒá¬ ááá¬áááœá±ážáá»ááºááŸá¯ááŒáá·áº ááŒáá·áºáá¬ážáá±á¬á¡áá°áá»áááºááᯠááá¯ááá¯áá¶ááá¯ááºáááºááŸááá¬ááá·áº áááá¯ááááºážáá»á¬ážááŒá áºáááºá áááºážááẠthermophilic áááºáá®ážáá®ážáá¬ážá០DNA polymerases ááá¯á¡áá¯á¶ážááŒá¯áááºá¡ááá¯ááŒá¯áá¬ážáááºá á€á¡ááºááá¯ááºážáá»á¬ážááẠá¡áá°áááºáá¶ááá¯ááºáá±á¬á¡ááœááºááŒá áºáá¬ááŒá®áž áá¯á¶á·ááŒááºááŸá¯áá¶ááá¬áá»á¬ážá áœá¬ááᯠáá¶ááá¯ááºáááºááŸááááºá áááºážááá¯á·áá¡áá¯á¶ážááŒá¯ááŸá¯ááẠPCR ááá¯ááá¯ážááŸááºážá á±ááŒá®ážá¡ááá¯á¡áá»á±á¬ááºáá¯ááºáá±á¬ááºááá¯ááºá á±áááºá ááááá¯á¶áž á¡áá°áá»áááºááááºážááá¯ááºáá±á¬ DNA áá±á«áºáá®áá¬áááºáá»á¬ážáá²á០áá áºáá¯ááᯠYellowstone National Park á áá±áá°á ááºážááœáẠáá±ááá¯ááºááá·áº áááºáá®ážáá®ážáá¬áž Thermus aquaticus á០ááœá²áá¯ááºááŒá®áž Taq polymerase áá¯áá±á«áºáááºá
PCR ááẠHuman Genome Project á áá»ááºááŒááºáá±á¬ á¡áá¯ááºááŒá áºáá¬áá²á·áááºá áá±áá°áá»á¡á¬ážááŒáá·áºá áá¯ááºáááºážá ááºááẠMullis ááŸáá®ááœááºáá¬ážááá·áºá¡áá¬ááŸáá·áºááá°áá²á áááºážááẠá¡ááá¯á¡áá»á±á¬ááºáá¯ááºáá±á¬ááºááŒááºážááŒá áºáá«áááºá ááááºá áá Ạá ááºážáááºááŒáœááºáá²ááá¯á· á¡áááºááŸá¯ááºáá»á¬ážááᯠá á°ážá á°ážá áá¯ááºá áá¯áẠáá±á¬ááºážááá·áºáá±ááá·áº áá¬ááºááŸá¯ááºááŸáááºááŸáááºáá±á¬ ááœá²á·ááá»á±á¬ááºážáá¬ážáá»á¬ážá áá°á¡á¯ááºááŒá®ážá¡áá±á«áº áá»áœááºá¯ááºááá¯á· ááŸá®ááá¯ááá±áá±á¬á·áá«á áá±ááºáá®áá¬ááºááœá²áááºážáá»á¬ážááœáẠáá±á¬áºáá®áá»á°ážáá»áá¯ážááá¯ážáá®áááá¯ááºáᬠáá¯áá±ááááŒá¯ááŸá¯ááœááºá á€áá¯ááºáááºážááᯠá ááºáá¯ááºá¡ááœá¬ážá¡áá¬áá»á¬ážáá±á«áºááœáẠáá¯ááºáá±á¬ááºáááºá Human Genome áá²á·ááá¯á· ááŒá®ážáá¬ážááá·áº á á®á á áºááŒááºáž ááá±á¬áá»ááºáá áºáá¯ááœáẠáá«áááºááá·áº PCR á ááºáá¯ááºáá»á¬ážááẠá¡áá°áááºááŒáááºáá±á¬ áá±á«áºáá®áá¬áá Ạááá¬ááá»á¬ážá áœá¬ááŒáá·áº ááá¯ááºááá Ạáá¯ááºáá±á¬ááºáááºá Human Genome ááá±á¬áá»ááºááœáẠáá¯ááºáá±á¬ááºáá±áá±á¬ áááá¹áá¶ááá¬ááŸááºá¡áá»áá¯á·ááẠá¥áá±á¬áá ááºááŸá¯áá¯ááºáááºážáá±ážáá«ážáá¯áá¹ááá®ááŒá®áž Hoffmann-LaRoche á PCR áá°ááá¯ááºááœáá·áºááá¯ááºááŸááºá០á á¬ážáá¯á¶ážáá¯ááºáá»á¬áž áá¯ááºáá»á ááááºááœáẠáá»áá¯ážááŒá±á¬ááºážááá®ááœááºá áœá¬ ááŒáá·áºáá¬ážáá±á¬ á ááááºá ááá»á¬áž áá±á«ááºážááá·áºááŒááºážááŒá±á¬áá·áº áá±á«áááœááºáá²á·ááŒáááºá
áá±á¬ááºááẠ"áá±á¬ááºážááŸááºááŸá¯áááá¬á" ááŸá¬ DNA sequencing method ááá¯ááºááá¯ááºááŒá áºáááºá á€áááºážáááºážá áá¬áá¯á¡ááŒá±áá¶ááẠááá¯á¡áá»áááºá á¡áá áºááá¯ááºáá±á¬á·áá«- Interstate Human Genome Project (HGP) ááẠ1970 áá¯ááŸá áºáá»á¬ážá¡áááºááá¯ááºážááœáẠFred Sanger áá®ááœááºáá²á·áá±á¬ áá°áá®áá±á¬ááá¬ááŸááááºážáááºážááᯠáááºáá¶áá»áá·áºáá¯á¶ážáá²á·áááºá áááºážáá áºáá®ááœááºááŸá¯ááẠá á®áááºážá á®ááŒááºážááᯠá¡á±á¬ááºááŒááºá¡á±á¬ááºáá±á¬ááºááœááºááá¯ááºáá±á¬ á¡ááá¯á¡áá»á±á¬ááºá áá áºá á¡ááá¯ááºážá¡áá¬ááŸáá·áº á¡ááá¯ááºážá¡áá¬ááá¯á·á ááá·áºááœááºážáá¬ážáááºá
áááºáá®ááá¯ážáá®ážáá¬áž áááºážááá¬ááá¹áááá¯ááºááŸá Lee Hood á áá¬ááºááœá²áááºážááœáẠá¡ááá¯á¡áá»á±á¬áẠá á®á á áºááŒááºážááᯠáá°áá áá®ááœááºáá²á·áááºá áá°ááẠMontana ááœáẠá¡áááºáááºážáá»á±á¬ááºážáááºáá²á·ááŒá®áž áá±á¬ááááºáá±á¬áá¯á¶ážááᯠquarterback á¡ááŒá áºáá á¬ážáá²á·áááºá Hood á áá»á±ážáá°ážááŒá±á¬áá·áº á¡áááºážááẠááŒááºáááºáá»ááºáá®áá¶áá¯ááᯠáá áºááŒáááºáááºáá áááŸááá²á·áááºá áá°á á¡ááœá²á·ááá¯ááºáá¯ááºáá±á¬ááºááŸá¯á áœááºážáááºáá»á¬ážááẠáá°á áááá¹áá¶á¡áááºááœá±ážáááºážááŒá±á¬ááºážááœáẠá¡áá¯á¶ážáááºáá¬áá«áááºá Hood á áá¬ááºááœá²áááºážááᯠáá¬áá¯áá±áááá¬ááŸááºá áá®ááá±áááá¬ááŸááºááŸáá·áº á¡ááºáá»ááºáá®áá¬áá»á¬áž ááŸá±á¬áºáááºáá±á¬ á¡ááŸá¯áááºážáá»á¬ážááŒáá·áº áááºáááºážááá·áºáá¬ážááŒá®áž áááŒá¬áá® áá°ááá¬ááºááœá²áááºážááẠáááºážááá¬áááºážáá áºáá®ááœááºááŸá¯ááœáẠáŠážáá±á¬ááºáá°ááŒá áºáá¬áá²á·áááºá
ááááºáá±á¬á·á á¡ááá¯á¡áá»á±á¬áẠsequencing áááºážáááºážááᯠLloyd Smith áá²á· Mike Hunkapiller ááá¯á·á áá®ááœááºáá²á·áá¬ááŒá áºáá«áááºá ááá¯á·áá±á¬áẠHood ááá¬ááºááœá²áááºážááœááºá¡áá¯ááºáá¯ááºáá±áá±á¬ Mike Hunkapiller ááẠá¡ááŒá±áá¶á¡áá»áá¯ážá¡á á¬ážáá áºáá¯á á®ááᯠá¡áá±á¬ááºááœá²ááŒá¬ážá á±ááá·áº ááá¯ááá¯áá±á¬ááºážááœááºáá±á¬ sequencing áááºážáááºážá¡ááœáẠá¡ááá¯ááŒá¯áá»ááºáá áºáá¯ááŒáá·áº Lloyd Smith ááá¯á·áá»ááºážáááºáá²á·áááºá ááá¯á¡ááŒá¶á¡á ááºááẠSanger áá¯ááºáááºážá ááºá áááá±á¬ááºááŸá¯ááᯠáá±ážáááá¯ážá á±ááá¯ááºáááºá Sanger ááœááºá áá±ážááŒáœááºáá áºáá¯á á®ááœáẠ(ááŒá±áááºážá¡áá±á¡ááœááºá¡á) á á®á á áºáá±á¬á¡áá«á DNA polymerase ááá«áááºááŸá¯ááŸáá·áºá¡áá°á primer sequence á¡áá«á¡ááẠááá°áá®áá±á¬á¡ááŸááºááŸááá±á¬ oligonucleotides ááá°ážááŒá¬ážáá±á¬á¡á á¯á¡áá±ážáá áºáá¯ááᯠááœá²á·á ááºážáááºá ááá¯á·áá±á¬áẠááœááºážáááºááœá²ááŒááºážá¡ááœáẠáá±á¬áºááá¯ááºážááᯠááŒáœááºáá»á¬ážáá²ááá¯á· ááá·áºááŒá®áž polyacrylamide gel electrophoresis ááᯠáá±ážáááºážááœá¬ážááœáẠááŒá¯áá¯ááºáá²á·áááºá Smith ááŸáá·áº Hunkapiller ááá¬ážááŸááºážááœááºá dideoxynucleotides áá»á¬ážááᯠááá°áá®áá±á¬ááá¯ážáá±áž áá±ážáá»áá¯ážááŒáá·áº áá¶ááááºáááºáá¬ážááŒá®áž PCR ááᯠááŒáœááºáá áºáá¯ááœáẠáá¯ááºáá±á¬ááºáááºá ááá¯á·áá±á¬ááºá polyacrylamide gel electrophoresis áá¬áá¡ááœááºážá gel áá±á«áºááŸá áááá»áá±á¬áá±áá¬áá áºáá¯á០áá±áá¬áá±á¬ááºááŒááºááẠááá¯ážáá±ážáá»á¬ážááá¯ááºáá±á¬ááºáá»ááºááᯠááŸá¯á¶á·áá±á¬áºáá±ážááŒá®áž detector á០áááºááá·áº nucleotide ááẠgel ááŸáááá·áº ááœá±á·ááŒá±á¬ááºážáá±ááŒá±á¬ááºáž áá¯á¶ážááŒááºáááºá ááááá±á¬á· Smith ááẠá¡ááá¯ážááŒááºáá°ááŒá áºááẠ- á¡ááœááºáááºážáá±á¬ ááá¯ážáá±ážáá»á¬ážááᯠá¡áá¯á¶ážááŒá¯ááŒááºážááŒáá·áº nucleotide áá±ááá»á¬ážááᯠááœá²ááŒá¬ážááááá±á¬á·áááºááᯠáá°á áá¯ážááááºáá²á·áááºá ááá¯á·áá±á¬áºá áá±áá¬áááºážááá¬ááᯠáá±á¬ááºážá áœá¬áá¬ážáááºáá¬ážááŒá®ážá áá±áá¬áá±á¬ááºááŒááºááŸáá·áºááááœá±á·áá±á¬á¡áá« fluoresce ááŒá áºáá±á¬ á¡áá°áž fluorochrome ááá¯ážáá±ážáá»á¬ážááᯠá¡áá¯á¶ážááŒá¯á áááŒá¬áá® á¡ááŒá±á¡áá±ááŸááœááºááŒá±á¬ááºááẠáááºážáááºážááᯠááŸá¬ááœá±ááœá±á·ááŸááá²á·áááºá
(áá¬ážááŸááºážá¡ááŒáá·áºá¡á
á¯á¶
Sanger áááºážáááºážá ááá¹ááááºáá¬ážááŸááºážááœááºá ááœá²ááŒááºážá áááºááŒá¬áá¬ážáá±á¬ DNA á ááŒáá¯ážáá»áŸááºáá»á¬ážáá²á០áá áºáá¯ááẠá¡ááºááá¯ááºáž DNA polymerase ááŒáá·áº ááŒáá·áºá áœááºááŒáá¯ážáá»áŸááºáá»á¬áž áá±á«ááºážá ááºááŸá¯á¡ááœáẠááá°áá¬á¡ááŒá Ạáá¯ááºáá±á¬ááºáááºá ááá¯á·áá±á¬áẠDNA á¡ááá¯ááºážá¡á áá»á¬ážá á¡á á®á¡á á¥áºááᯠá¡ááœááºá¡á á¬ážá¡ááá¯áẠáá»ááºááºááŒáá·áº á á®ááœá²áá¬ážáááºá áá±á«ááºážá ááºá ááºá¡ááœááºáž DNA ááœááºáá«áááºááŒá®áž áá¯á¶á·ááŒááºááŸá¯áá¯ááºáá¯ááºáá»á¬ážá áá±á¬ááºáááºááœá²áá¯á¶ááááºááᯠááŒááºááá¯ááºá á±ááá·áº á¡ááá¯ááºážáá áºáá¯á á®ááᯠterminal base ááŸáá·áº áááºááá¯ááºáá±á¬ áá»á±á¬ááºážááá¯ážáá±ážááŒáá·áº áá¶ááááºáááºáá¬ážááẠ(áááºážááᯠp. 124 ááœáẠááœá±ážááœá±ážáá²á·áááº)á ááá¯á·ááŒá±á¬áá·áºá á€á¡ááá¯ááºážá¡á á fluorescence ááẠáá±ážáá¬ážáá±á¬ base á¡ááœáẠidentifier áá áºáá¯ááŒá áºáááá·áºáááºá ááá¯á·áá±á¬áẠáá»ááºááŸááá±áá±á¬ á¡áá¬á¡á¬ážáá¯á¶ážááŸá¬ áá¯á¶á·ááŒááºááŸá¯ áá¯ááºáá¯ááºáá»á¬ážááᯠáá±á¬ááºááŸááºážá ááŒááºáá¬á¡á±á¬áẠáá¯ááºáá±á¬ááºáááºááŒá áºáááºá ááááºáá»á¬ážááᯠááœááºáá»á°áá¬ááŒáá·áº ááœá²ááŒááºážá áááºááŒá¬ááŒá®áž nucleotides áá±ážáá¯ááŸáá·áº áááºááá¯ááºááá·áº áá±á¬ááºá á¯á¶áá±á¬ááºáááºážáá»á¬ážá á¡á á®á¡á á¥áºá¡ááŒá ẠáááºááŒáá«áááºá ááá¯á·áá±á¬áẠá¡áá»ááºá¡áááºáá»á¬ážááᯠááœááºáá»á°áá¬á á¡áá»ááºá¡áááºá áá áºááá¯á· ááá¯ááºááá¯ááºááœáŸá²ááŒá±á¬ááºážáá±ážáᬠá¡áá»áááºáá¯ááºááŒá®áž áá áºáá«áá áºáᶠáá¬áá»ááºá á±áá±á¬ áá±áá¬ááá·áºááœááºážááŒááºážáá¯ááºáááºážá ááºááᯠáááºááŸá¬ážáá±ážáá«áááºá
» á
á¬á¡á¯ááºááŸáá·áºáááºáááºáá±á¬ á¡áá±ážá
áááºá¡áá»ááºá¡áááºáá»á¬ážááᯠá¡á±á¬ááºáá«ááá·áºááœáẠááŒáá·áºááŸá¯ááá¯ááºáá«áááºá
»
»
Khabrozhiteley áá°ááœááºááá¯á¡áá¯á¶ážááŒá¯á 25% áá»áŸá±á¬á·á
á»á±ážá¡ááœáẠ- PCR
source: www.habr.com