ਡੀਐਨਏ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਚੇਨ ਰੀਐਕਸ਼ਨ ਦੇ ਖੋਜੀ ਨੋਬਲ ਪੁਰਸਕਾਰ ਜੇਤੂ ਕੈਰੀ ਮੁਲਿਸ ਦੀ ਮੌਤ ਹੋ ਗਈ ਹੈ

ਕੈਮਿਸਟਰੀ ਵਿੱਚ ਨੋਬਲ ਪੁਰਸਕਾਰ ਜੇਤੂ ਅਮਰੀਕੀ ਕੈਰੀ ਮੁਲਿਸ ਦਾ ਕੈਲੀਫੋਰਨੀਆ ਵਿੱਚ 74 ਸਾਲ ਦੀ ਉਮਰ ਵਿੱਚ ਦੇਹਾਂਤ ਹੋ ਗਿਆ। ਉਸ ਦੀ ਪਤਨੀ ਅਨੁਸਾਰ ਮੌਤ 7 ਅਗਸਤ ਨੂੰ ਹੋਈ ਸੀ। ਕਾਰਨ ਨਮੂਨੀਆ ਕਾਰਨ ਦਿਲ ਅਤੇ ਸਾਹ ਦੀ ਅਸਫਲਤਾ ਹੈ.

ਜੇਮਜ਼ ਵਾਟਸਨ ਖੁਦ, ਡੀਐਨਏ ਅਣੂ ਦੀ ਖੋਜ ਕਰਨ ਵਾਲਾ, ਸਾਨੂੰ ਬਾਇਓਕੈਮਿਸਟਰੀ ਵਿੱਚ ਉਸਦੇ ਯੋਗਦਾਨ ਬਾਰੇ ਦੱਸੇਗਾ ਅਤੇ ਜਿਸ ਲਈ ਉਸਨੂੰ ਨੋਬਲ ਪੁਰਸਕਾਰ ਮਿਲਿਆ ਸੀ।

ਜੇਮਜ਼ ਵਾਟਸਨ, ਐਂਡਰਿਊ ਬੇਰੀ, ਕੇਵਿਨ ਡੇਵਿਸ ਦੀ ਕਿਤਾਬ ਤੋਂ ਅੰਸ਼

ਡੀ.ਐਨ.ਏ. ਜੈਨੇਟਿਕ ਕ੍ਰਾਂਤੀ ਦਾ ਇਤਿਹਾਸ

ਅਧਿਆਇ 7. ਮਨੁੱਖੀ ਜੀਨੋਮ। ਜੀਵਨ ਦ੍ਰਿਸ਼

...
ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਚੇਨ ਰਿਐਕਸ਼ਨ (ਪੀਸੀਆਰ) ਦੀ ਖੋਜ 1983 ਵਿੱਚ ਬਾਇਓਕੈਮਿਸਟ ਕੈਰੀ ਮੁਲਿਸ ਦੁਆਰਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਜੋ ਕੇਟਸ ਵਿੱਚ ਕੰਮ ਕਰਦੇ ਸਨ। ਇਸ ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਦੀ ਖੋਜ ਕਾਫ਼ੀ ਕਮਾਲ ਦੀ ਸੀ। ਮੁਲਿਸ ਨੇ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਯਾਦ ਕੀਤਾ: “ਅਪ੍ਰੈਲ 1983 ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਸ਼ੁੱਕਰਵਾਰ ਸ਼ਾਮ ਨੂੰ, ਮੈਨੂੰ ਇੱਕ ਐਪੀਫਨੀ ਸੀ। ਮੈਂ ਪਹੀਏ ਦੇ ਪਿੱਛੇ ਸੀ, ਉੱਤਰੀ ਕੈਲੀਫੋਰਨੀਆ, ਰੈੱਡਵੁੱਡ ਦੇ ਜੰਗਲਾਂ ਦੀ ਧਰਤੀ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਚੰਨ ਦੀ ਰੌਸ਼ਨੀ, ਪਹਾੜੀ ਸੜਕ ਨੂੰ ਘੁਮਾ ਰਿਹਾ ਸੀ। ਇਹ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਹੈ ਕਿ ਇਹ ਅਜਿਹੀ ਸਥਿਤੀ ਵਿੱਚ ਸੀ ਕਿ ਪ੍ਰੇਰਨਾ ਨੇ ਉਸਨੂੰ ਮਾਰਿਆ. ਅਤੇ ਅਜਿਹਾ ਨਹੀਂ ਹੈ ਕਿ ਉੱਤਰੀ ਕੈਲੀਫੋਰਨੀਆ ਦੀਆਂ ਖਾਸ ਸੜਕਾਂ ਹਨ ਜੋ ਸਮਝ ਨੂੰ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ; ਇਹ ਸਿਰਫ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਉਸਦੇ ਦੋਸਤ ਨੇ ਇੱਕ ਵਾਰ ਮੁਲਿਸ ਨੂੰ ਇੱਕ ਬਰਫੀਲੇ ਦੋਹਰੇ ਕੈਰੇਜਵੇਅ 'ਤੇ ਲਾਪਰਵਾਹੀ ਨਾਲ ਤੇਜ਼ ਰਫਤਾਰ ਨਾਲ ਚਲਦੇ ਦੇਖਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਇਸਨੇ ਉਸਨੂੰ ਬਿਲਕੁਲ ਵੀ ਪਰੇਸ਼ਾਨ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਸੀ। ਇੱਕ ਦੋਸਤ ਨੇ ਨਿਊਯਾਰਕ ਟਾਈਮਜ਼ ਨੂੰ ਦੱਸਿਆ: “ਮੂਲਿਸ ਨੂੰ ਇੱਕ ਦਰਸ਼ਣ ਸੀ ਕਿ ਉਹ ਇੱਕ ਰੇਡਵੁੱਡ ਦੇ ਦਰੱਖਤ ਨਾਲ ਟਕਰਾਉਣ ਨਾਲ ਮਰ ਜਾਵੇਗਾ। ਇਸ ਲਈ, ਉਹ ਗੱਡੀ ਚਲਾਉਂਦੇ ਸਮੇਂ ਕਿਸੇ ਵੀ ਚੀਜ਼ ਤੋਂ ਨਹੀਂ ਡਰਦਾ, ਜਦੋਂ ਤੱਕ ਕਿ ਸੜਕ ਦੇ ਨਾਲ-ਨਾਲ ਲਾਲ ਲੱਕੜ ਦੇ ਦਰੱਖਤ ਉੱਗਦੇ ਨਾ ਹੋਣ।" ਸੜਕ ਦੇ ਨਾਲ ਰੇਡਵੁੱਡਸ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਨੇ ਮੂਲਿਸ ਨੂੰ ਧਿਆਨ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਮਜ਼ਬੂਰ ਕੀਤਾ ਅਤੇ... ਇੱਥੇ ਇਹ ਇੱਕ ਸਮਝ ਸੀ। ਮੁਲਿਸ ਨੂੰ 1993 ਵਿੱਚ ਉਸਦੀ ਕਾਢ ਲਈ ਰਸਾਇਣ ਵਿਗਿਆਨ ਵਿੱਚ ਨੋਬਲ ਪੁਰਸਕਾਰ ਮਿਲਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਉਦੋਂ ਤੋਂ ਉਸਦੇ ਕੰਮਾਂ ਵਿੱਚ ਹੋਰ ਵੀ ਅਜਨਬੀ ਬਣ ਗਏ ਹਨ। ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, ਉਹ ਸੋਧਵਾਦੀ ਸਿਧਾਂਤ ਦਾ ਸਮਰਥਕ ਹੈ ਕਿ ਏਡਜ਼ ਐੱਚਆਈਵੀ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਜਿਸ ਨੇ ਉਸ ਦੀ ਆਪਣੀ ਸਾਖ ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਕਮਜ਼ੋਰ ਕੀਤਾ ਅਤੇ ਡਾਕਟਰਾਂ ਨਾਲ ਦਖਲ ਦਿੱਤਾ।

ਪੀਸੀਆਰ ਇੱਕ ਕਾਫ਼ੀ ਸਧਾਰਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਹੈ। ਇਸ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਲਈ, ਸਾਨੂੰ ਦੋ ਰਸਾਇਣਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸਿੰਥੇਸਾਈਜ਼ਡ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ ਜੋ ਲੋੜੀਂਦੇ DNA ਟੁਕੜੇ ਦੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਤਾਰਾਂ ਦੇ ਉਲਟ ਸਿਰਿਆਂ ਦੇ ਪੂਰਕ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਛੋਟੇ ਭਾਗ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਹਰੇਕ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਵਿੱਚ ਲਗਭਗ 20 ਬੇਸ ਜੋੜੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਉਹ ਡੀਐਨਏ ਭਾਗਾਂ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦੇ ਹਨ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਯਾਨੀ ਡੀਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ।

(ਚਿੱਤਰ ਕਲਿੱਕ ਕਰਨ ਯੋਗ) ਕੈਰੀ ਮੁਲਿਸ, ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਖੋਜੀ

ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਟੈਂਪਲੇਟ ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ, ਛੋਟੇ ਸਿੰਥੈਟਿਕ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਸ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਪੂਰਕ ਕੰਪਲੈਕਸਾਂ ਦੇ ਗਠਨ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੈ. ਹਰੇਕ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੇ ਇੱਕ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਦਾ ਪੂਰਕ ਹੈ ਅਤੇ ਐਂਪਲੀਫਾਈਡ ਖੇਤਰ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਅਤੇ ਅੰਤ ਨੂੰ ਸੀਮਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਵਾਸਤਵ ਵਿੱਚ, ਨਤੀਜਾ "ਮੈਟ੍ਰਿਕਸ" ਇੱਕ ਪੂਰਾ ਜੀਨੋਮ ਹੈ, ਅਤੇ ਸਾਡਾ ਟੀਚਾ ਇਸ ਤੋਂ ਸਾਡੇ ਲਈ ਦਿਲਚਸਪੀ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਅਲੱਗ ਕਰਨਾ ਹੈ। ਅਜਿਹਾ ਕਰਨ ਲਈ, ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ ਨੂੰ ਡੀਐਨਏ ਸਟ੍ਰੈਂਡਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਕਈ ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 95 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤੱਕ ਗਰਮ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਪੜਾਅ ਨੂੰ ਵਿਨਾਸ਼ਕਾਰੀ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਕਿਉਂਕਿ ਦੋ ਡੀਐਨਏ ਤਾਰਾਂ ਵਿਚਕਾਰ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਬਾਂਡ ਟੁੱਟ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। ਇੱਕ ਵਾਰ ਤਾਰਾਂ ਵੱਖ ਹੋ ਜਾਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਘਟਾ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਨੂੰ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਟੈਂਪਲੇਟ ਨਾਲ ਜੋੜਿਆ ਜਾ ਸਕੇ। ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਚੇਨ ਦੇ ਇੱਕ ਫੈਲਾਅ ਨਾਲ ਬੰਨ੍ਹ ਕੇ ਡੀਐਨਏ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਤੀ ਸ਼ੁਰੂ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਡੀਐਨਏ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਟੈਂਪਲੇਟ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਜਾਂ ਕਾਪੀ ਕਰਨ ਲਈ ਉਦਾਹਰਨ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਨਕਲ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਪਹਿਲੇ ਚੱਕਰ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ, ਅਸੀਂ ਇੱਕ ਖਾਸ ਡੀਐਨਏ ਸੈਕਸ਼ਨ ਦੀ ਮਲਟੀਪਲ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਦੁੱਗਣੀ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਦੇ ਹਾਂ। ਅੱਗੇ ਅਸੀਂ ਇਸ ਵਿਧੀ ਨੂੰ ਦੁਹਰਾਉਂਦੇ ਹਾਂ. ਹਰੇਕ ਚੱਕਰ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਅਸੀਂ ਦੁੱਗਣੀ ਮਾਤਰਾ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਟੀਚਾ ਖੇਤਰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਦੇ ਹਾਂ। 225 PCR ਚੱਕਰਾਂ (ਭਾਵ, ਦੋ ਘੰਟਿਆਂ ਤੋਂ ਵੀ ਘੱਟ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ) ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਸਾਡੇ ਕੋਲ ਅਸਲ ਨਾਲੋਂ 34 ਗੁਣਾ ਵੱਧ (ਭਾਵ, ਅਸੀਂ ਇਸਨੂੰ ਲਗਭਗ XNUMX ਮਿਲੀਅਨ ਵਾਰ ਵਧਾ ਦਿੱਤਾ ਹੈ) ਵਿੱਚ ਸਾਡੇ ਲਈ ਦਿਲਚਸਪੀ ਵਾਲਾ ਡੀਐਨਏ ਖੇਤਰ ਹੈ। ਵਾਸਤਵ ਵਿੱਚ, ਇੰਪੁੱਟ 'ਤੇ ਸਾਨੂੰ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ, ਟੈਂਪਲੇਟ ਡੀਐਨਏ, ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਅਤੇ ਮੁਫਤ ਅਧਾਰਾਂ A, C, G ਅਤੇ T ਦਾ ਮਿਸ਼ਰਣ ਪ੍ਰਾਪਤ ਹੋਇਆ, ਇੱਕ ਖਾਸ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਮਾਤਰਾ (ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੁਆਰਾ ਸੀਮਿਤ) ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਵਧਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਸੰਖਿਆ "ਲੰਬੀਆਂ" ਡੀਐਨਏ ਕਾਪੀਆਂ ਰੇਖਿਕ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ, ਇਸਲਈ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਉਤਪਾਦਾਂ ਵਿੱਚ ਹਾਵੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।

ਲੋੜੀਂਦੇ ਡੀਐਨਏ ਭਾਗ ਦਾ ਪ੍ਰਸਾਰ: ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਚੇਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ

ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਦਿਨਾਂ ਵਿੱਚ, ਮੁੱਖ ਸਮੱਸਿਆ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੀ ਗਈ ਸੀ: ਹਰ ਇੱਕ ਹੀਟਿੰਗ-ਕੂਲਿੰਗ ਚੱਕਰ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਨੂੰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਮਿਸ਼ਰਣ ਵਿੱਚ ਜੋੜਨਾ ਪੈਂਦਾ ਸੀ, ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ 95 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਤੇ ਅਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਸੀ। ਇਸ ਲਈ, ਹਰ 25 ਚੱਕਰਾਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਇਸਨੂੰ ਦੁਬਾਰਾ ਜੋੜਨਾ ਜ਼ਰੂਰੀ ਸੀ. ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਿਧੀ ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਅਕੁਸ਼ਲ ਸੀ, ਬਹੁਤ ਸਾਰਾ ਸਮਾਂ ਅਤੇ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਲੋੜ ਸੀ, ਅਤੇ ਸਮੱਗਰੀ ਬਹੁਤ ਮਹਿੰਗੀ ਸੀ। ਖੁਸ਼ਕਿਸਮਤੀ ਨਾਲ, ਮਾਂ ਕੁਦਰਤ ਬਚਾਅ ਲਈ ਆਈ. ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਜਾਨਵਰ 37 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤੋਂ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਆਰਾਮਦਾਇਕ ਮਹਿਸੂਸ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਸਾਡੇ ਲਈ 37 ਡਿਗਰੀ ਸੈਂਟੀਗਰੇਡ ਦਾ ਅੰਕੜਾ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਕਿਉਂ ਬਣ ਗਿਆ? ਅਜਿਹਾ ਇਸ ਲਈ ਹੋਇਆ ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ ਤਾਪਮਾਨ ਈ. ਕੋਲੀ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ ਹੈ, ਜਿਸ ਤੋਂ ਪੀਸੀਆਰ ਲਈ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਅਸਲ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਕੁਦਰਤ ਵਿੱਚ ਅਜਿਹੇ ਸੂਖਮ ਜੀਵ ਹਨ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ, ਕੁਦਰਤੀ ਚੋਣ ਦੇ ਲੱਖਾਂ ਸਾਲਾਂ ਤੋਂ ਵੱਧ, ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨਾਂ ਲਈ ਵਧੇਰੇ ਰੋਧਕ ਬਣ ਗਏ ਹਨ। ਥਰਮੋਫਿਲਿਕ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਤੋਂ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦਾ ਪ੍ਰਸਤਾਵ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ। ਇਹ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਥਰਮੋਸਟਬਲ ਸਾਬਤ ਹੋਏ ਅਤੇ ਕਈ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਚੱਕਰਾਂ ਦਾ ਸਾਮ੍ਹਣਾ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਸਨ। ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨੇ ਪੀਸੀਆਰ ਨੂੰ ਸਰਲ ਅਤੇ ਸਵੈਚਾਲਿਤ ਕਰਨਾ ਸੰਭਵ ਬਣਾਇਆ ਹੈ। ਪਹਿਲੇ ਥਰਮੋਸਟੇਬਲ ਡੀਐਨਏ ਪੌਲੀਮੇਰੇਸ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਥਰਮਸ ਐਕਵਾਟਿਕਸ ਤੋਂ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਜੋ ਯੈਲੋਸਟੋਨ ਨੈਸ਼ਨਲ ਪਾਰਕ ਦੇ ਗਰਮ ਚਸ਼ਮੇ ਵਿੱਚ ਰਹਿੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਟਾਕ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਨਾਮ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।

ਪੀਸੀਆਰ ਜਲਦੀ ਹੀ ਮਨੁੱਖੀ ਜੀਨੋਮ ਪ੍ਰੋਜੈਕਟ ਦਾ ਕੰਮ ਦਾ ਹਾਰਸ ਬਣ ਗਿਆ। ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਇਹ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਮੂਲਿਸ ਦੁਆਰਾ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਤੋਂ ਵੱਖਰੀ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਇਹ ਹੁਣੇ ਹੀ ਸਵੈਚਾਲਿਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ. ਅਸੀਂ ਹੁਣ ਪਲਾਸਟਿਕ ਦੇ ਟੈਸਟ ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚ ਤਰਲ ਦੀਆਂ ਬੂੰਦਾਂ ਨੂੰ ਬੜੀ ਮਿਹਨਤ ਨਾਲ ਡੋਲ੍ਹਣ ਵਾਲੇ ਮੱਧਮ ਬੁੱਧੀ ਵਾਲੇ ਗ੍ਰੈਜੂਏਟ ਵਿਦਿਆਰਥੀਆਂ ਦੀ ਭੀੜ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਨਹੀਂ ਰਹੇ। ਅਣੂ ਜੈਨੇਟਿਕ ਖੋਜ ਕਰਨ ਵਾਲੀਆਂ ਆਧੁਨਿਕ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਵਿੱਚ, ਇਹ ਕੰਮ ਰੋਬੋਟਿਕ ਕਨਵੇਅਰਾਂ 'ਤੇ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਪੀਸੀਆਰ ਰੋਬੋਟ ਮਨੁੱਖੀ ਜੀਨੋਮ ਜਿੰਨਾ ਵੱਡੇ ਕ੍ਰਮ-ਸਥਿਰ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਵੱਡੀ ਮਾਤਰਾ ਦੇ ਨਾਲ ਨਿਰੰਤਰ ਕੰਮ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਹਿਊਮਨ ਜੀਨੋਮ ਪ੍ਰੋਜੈਕਟ 'ਤੇ ਕੰਮ ਕਰ ਰਹੇ ਕੁਝ ਵਿਗਿਆਨੀ ਪੀਸੀਆਰ ਪੇਟੈਂਟ, ਯੂਰਪੀਅਨ ਉਦਯੋਗਿਕ ਫਾਰਮਾਸਿਊਟੀਕਲ ਕੰਪਨੀ ਹਾਫਮੈਨ-ਲਾਰੋਚੇ ਦੇ ਮਾਲਕ ਦੁਆਰਾ ਖਪਤਯੋਗ ਵਸਤੂਆਂ ਦੀ ਕੀਮਤ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੀ ਗਈ ਗੈਰ-ਵਾਜਬ ਉੱਚ ਰਾਇਲਟੀ ਤੋਂ ਨਾਰਾਜ਼ ਸਨ।

ਇੱਕ ਹੋਰ "ਡਰਾਈਵਿੰਗ ਸਿਧਾਂਤ" ਖੁਦ ਡੀਐਨਏ ਸੀਕੁਏਂਸਿੰਗ ਵਿਧੀ ਸੀ। ਇਸ ਵਿਧੀ ਦਾ ਰਸਾਇਣਕ ਆਧਾਰ ਉਸ ਸਮੇਂ ਕੋਈ ਨਵਾਂ ਨਹੀਂ ਸੀ: ਇੰਟਰਸਟੇਟ ਹਿਊਮਨ ਜੀਨੋਮ ਪ੍ਰੋਜੈਕਟ (HGP) ਨੇ ਉਹੀ ਹੁਸ਼ਿਆਰ ਢੰਗ ਅਪਣਾਇਆ ਜੋ ਫਰੇਡ ਸੈਂਗਰ ਨੇ 1970 ਦੇ ਦਹਾਕੇ ਦੇ ਅੱਧ ਵਿੱਚ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਸੀ। ਨਵੀਨਤਾ ਆਟੋਮੇਸ਼ਨ ਦੇ ਪੈਮਾਨੇ ਅਤੇ ਡਿਗਰੀ ਵਿੱਚ ਪਈ ਹੈ ਜੋ ਕ੍ਰਮ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਸੀ।

ਸਵੈਚਲਿਤ ਕ੍ਰਮ ਨੂੰ ਅਸਲ ਵਿੱਚ ਕੈਲੀਫੋਰਨੀਆ ਇੰਸਟੀਚਿਊਟ ਆਫ਼ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀ ਵਿੱਚ ਲੀ ਹੂਡ ਦੀ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਉਸਨੇ ਮੋਂਟਾਨਾ ਵਿੱਚ ਹਾਈ ਸਕੂਲ ਵਿੱਚ ਪੜ੍ਹਾਈ ਕੀਤੀ ਅਤੇ ਇੱਕ ਕੁਆਰਟਰਬੈਕ ਵਜੋਂ ਕਾਲਜ ਫੁੱਟਬਾਲ ਖੇਡਿਆ; ਹੁੱਡ ਦਾ ਧੰਨਵਾਦ, ਟੀਮ ਨੇ ਇੱਕ ਤੋਂ ਵੱਧ ਵਾਰ ਸਟੇਟ ਚੈਂਪੀਅਨਸ਼ਿਪ ਜਿੱਤੀ। ਉਸ ਦੇ ਵਿਗਿਆਨਕ ਕਰੀਅਰ ਵਿੱਚ ਟੀਮ ਵਰਕ ਦੇ ਹੁਨਰ ਵੀ ਕੰਮ ਆਏ। ਹੁੱਡ ਦੀ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਰਸਾਇਣ ਵਿਗਿਆਨੀਆਂ, ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨੀਆਂ ਅਤੇ ਇੰਜੀਨੀਅਰਾਂ ਦੇ ਇੱਕ ਮੋਟਲੀ ਸਮੂਹ ਦੁਆਰਾ ਸਟਾਫ਼ ਸੀ, ਅਤੇ ਉਸਦੀ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਜਲਦੀ ਹੀ ਤਕਨੀਕੀ ਨਵੀਨਤਾ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਮੋਹਰੀ ਬਣ ਗਈ।

ਵਾਸਤਵ ਵਿੱਚ, ਆਟੋਮੇਟਿਡ ਸੀਕੁਏਂਸਿੰਗ ਵਿਧੀ ਦੀ ਖੋਜ ਲੋਇਡ ਸਮਿਥ ਅਤੇ ਮਾਈਕ ਹੰਕਾਪਿਲਰ ਦੁਆਰਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਮਾਈਕ ਹੰਕਾਪਿਲਰ, ਫਿਰ ਹੁੱਡ ਦੀ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਕੰਮ ਕਰ ਰਿਹਾ ਸੀ, ਨੇ ਲੋਇਡ ਸਮਿਥ ਨੂੰ ਇੱਕ ਸੁਧਰੀ ਹੋਈ ਸੀਕੈਂਸਿੰਗ ਵਿਧੀ ਦੇ ਪ੍ਰਸਤਾਵ ਨਾਲ ਸੰਪਰਕ ਕੀਤਾ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਹਰੇਕ ਕਿਸਮ ਦੇ ਅਧਾਰ ਨੂੰ ਵੱਖਰੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਰੰਗਿਆ ਜਾਵੇਗਾ। ਅਜਿਹਾ ਵਿਚਾਰ ਸੈਂਗਰ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨੂੰ ਚਾਰ ਗੁਣਾ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਸੈਂਗਰ ਵਿੱਚ, ਜਦੋਂ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਭਾਗੀਦਾਰੀ ਦੇ ਨਾਲ, ਚਾਰ ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਹਰੇਕ ਵਿੱਚ ਕ੍ਰਮਬੱਧ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਇੱਕ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਕ੍ਰਮ ਸਮੇਤ, ਵੱਖ ਵੱਖ ਲੰਬਾਈ ਦੇ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਸ ਦਾ ਇੱਕ ਵਿਲੱਖਣ ਸਮੂਹ ਬਣਦਾ ਹੈ। ਅੱਗੇ, ਫਾਰਮਾਮਾਈਡ ਨੂੰ ਚੇਨ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਪੌਲੀਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਨੂੰ ਚਾਰ ਲੇਨਾਂ 'ਤੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਸਮਿਥ ਅਤੇ ਹੰਕਾਪਿਲਰ ਦੇ ਸੰਸਕਰਣ ਵਿੱਚ, ਡੀਡੀਓਕਸੀਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਸ ਨੂੰ ਚਾਰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਰੰਗਾਂ ਨਾਲ ਲੇਬਲ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਇੱਕ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਫਿਰ, ਪੌਲੀਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੇ ਦੌਰਾਨ, ਜੈੱਲ 'ਤੇ ਇੱਕ ਖਾਸ ਸਥਾਨ 'ਤੇ ਇੱਕ ਲੇਜ਼ਰ ਬੀਮ ਰੰਗਾਂ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਉਤੇਜਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਖੋਜਕਰਤਾ ਇਹ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਦਾ ਹੈ ਕਿ ਮੌਜੂਦਾ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ ਕਿਹੜਾ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਜੈੱਲ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਵਾਸ ਕਰ ਰਿਹਾ ਹੈ। ਪਹਿਲਾਂ, ਸਮਿਥ ਨਿਰਾਸ਼ਾਵਾਦੀ ਸੀ - ਉਸਨੂੰ ਡਰ ਸੀ ਕਿ ਡਾਈ ਦੀ ਅਤਿ-ਘੱਟ ਖੁਰਾਕਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਨਾਲ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਖੇਤਰਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਸੀ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਲੇਜ਼ਰ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀ ਸ਼ਾਨਦਾਰ ਸਮਝ ਹੋਣ ਕਰਕੇ, ਉਸਨੇ ਜਲਦੀ ਹੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਫਲੋਰੋਕ੍ਰੋਮ ਰੰਗਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਸਥਿਤੀ ਤੋਂ ਬਾਹਰ ਨਿਕਲਣ ਦਾ ਰਸਤਾ ਲੱਭ ਲਿਆ ਜੋ ਲੇਜ਼ਰ ਰੇਡੀਏਸ਼ਨ ਦੇ ਸੰਪਰਕ ਵਿੱਚ ਆਉਣ 'ਤੇ ਫਲੋਰੋਸ ਹੋ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।

(ਪੂਰਾ ਸੰਸਕਰਣ ਕਲਿੱਕ ਕਰਕੇ - 4,08 MB) ਫਾਈਨ ਪ੍ਰਿੰਟ: ਇੱਕ ਆਟੋਮੈਟਿਕ ਸੀਕੁਐਂਸਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮ ਕ੍ਰਮ, ਇੱਕ ਆਟੋਮੈਟਿਕ ਸੀਕੁਏਂਸਿੰਗ ਮਸ਼ੀਨ ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਹਰ ਰੰਗ ਚਾਰ ਅਧਾਰਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦਾ ਹੈ

ਸੈਂਗਰ ਵਿਧੀ ਦੇ ਕਲਾਸਿਕ ਸੰਸਕਰਣ ਵਿੱਚ, ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤੇ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਇੱਕ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੁਆਰਾ ਇੱਕ ਪੂਰਕ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਦੇ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਇੱਕ ਨਮੂਨੇ ਵਜੋਂ ਕੰਮ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਫਿਰ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੀ ਕ੍ਰਮ ਨੂੰ ਆਕਾਰ ਦੁਆਰਾ ਇੱਕ ਜੈੱਲ ਵਿੱਚ ਕ੍ਰਮਬੱਧ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਹਰ ਇੱਕ ਟੁਕੜਾ, ਜੋ ਕਿ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਡੀਐਨਏ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਵਿਜ਼ੂਅਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਦੀ ਆਗਿਆ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਨੂੰ ਟਰਮੀਨਲ ਬੇਸ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰੀ ਇੱਕ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਡਾਈ ਨਾਲ ਲੇਬਲ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ (ਇਸ ਬਾਰੇ ਪੰਨਾ 124 'ਤੇ ਚਰਚਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ); ਇਸਲਈ, ਇਸ ਫਰੈਗਮੈਂਟ ਦਾ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਦਿੱਤੇ ਅਧਾਰ ਲਈ ਇੱਕ ਪਛਾਣਕਰਤਾ ਹੋਵੇਗਾ। ਫਿਰ ਜੋ ਕੁਝ ਬਚਦਾ ਹੈ ਉਹ ਖੋਜ ਕਰਨ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੀ ਕਲਪਨਾ ਕਰਨਾ ਹੈ. ਨਤੀਜਿਆਂ ਦਾ ਕੰਪਿਊਟਰ ਦੁਆਰਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਚਾਰ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਾਂ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦੀਆਂ ਬਹੁ-ਰੰਗੀ ਚੋਟੀਆਂ ਦੇ ਕ੍ਰਮ ਵਜੋਂ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਜਾਣਕਾਰੀ ਨੂੰ ਫਿਰ ਕੰਪਿਊਟਰ ਦੇ ਸੂਚਨਾ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਵਿੱਚ ਸਿੱਧਾ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਸਮਾਂ ਬਰਬਾਦ ਕਰਨ ਵਾਲੀ ਅਤੇ ਕਈ ਵਾਰ ਦਰਦਨਾਕ ਡੇਟਾ ਐਂਟਰੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਖਤਮ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜਿਸ ਨਾਲ ਕ੍ਰਮ ਨੂੰ ਬਹੁਤ ਮੁਸ਼ਕਲ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।

»ਕਿਤਾਬ ਬਾਰੇ ਹੋਰ ਵੇਰਵੇ ਇਸ 'ਤੇ ਮਿਲ ਸਕਦੇ ਹਨ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਕ ਦੀ ਵੈੱਬਸਾਈਟ
» ਵਿਸ਼ਾ-ਸੂਚੀ
» ਅੰਸ਼

Khabrozhiteley ਲਈ ਕੂਪਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ 25% ਦੀ ਛੋਟ - ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ

ਸਰੋਤ: www.habr.com